無血清培養(yǎng)基是一種不含動(dòng)物血清成分的細(xì)胞培養(yǎng)基,它已成為生命科學(xué)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一。相比于傳統(tǒng)的含有動(dòng)物血清的培養(yǎng)基,具有一系列優(yōu)點(diǎn),例如可以減少細(xì)胞文化過程中的擾動(dòng)、提高細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量和可重復(fù)性、降低實(shí)驗(yàn)誤差等。
1.發(fā)展歷史
它起源于20世紀(jì)60年代至70年代初期,當(dāng)時(shí)研究人員開始意識(shí)到加入動(dòng)物血清會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾的問題。早期的培養(yǎng)基主要是通過去除動(dòng)物血清中影響細(xì)胞生長的成分來制備,例如去除血清中的抗體或凝集素等。隨著細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展,越來越多的研究表明動(dòng)物血清對于細(xì)胞的增殖、分化和表型的影響非常復(fù)雜,因此研究人員開始嘗試使用無血清的培養(yǎng)基。
現(xiàn)代無血清培養(yǎng)基主要是由兩種方法制備的。一種方法是使用化學(xué)合成物質(zhì),例如氨基酸、核苷酸、維生素等來替代動(dòng)物血清中的成分。另一種方法是使用其它來源的血清代替動(dòng)物血清,例如使用人類血漿或胚胎蛋白等。這些方法已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于各種類型的細(xì)胞培養(yǎng)中,包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、真菌和細(xì)菌等。
2.組成
無血清培養(yǎng)基的組成取決于所培養(yǎng)的細(xì)胞類型和研究目的。通常情況下,包含以下成分:
(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:通常是含有鹽、氨基酸、維生素和糖等基本營養(yǎng)成分的液體培養(yǎng)基。
(2)生長因子:可促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和存活的蛋白質(zhì),例如表皮生長因子(EGF)、基本纖維母細(xì)胞生長因子(bFGF)等。
(3)激素:參與調(diào)控細(xì)胞代謝和功能的蛋白質(zhì),例如胰島素、甲狀腺激素等。
(4)輔助因子:包括微量元素、抗生素、載體蛋白等,可以提高培養(yǎng)基的穩(wěn)定性和細(xì)胞增殖效率。
需要注意的是,無血清培養(yǎng)基中所含的成分可能會(huì)影響到細(xì)胞的表型和功能。因此,在選擇時(shí),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行優(yōu)化和調(diào)整。