IMDM培養(yǎng)基在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了硒、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素,并用硝酸鉀代替了硝酸鐵,營養(yǎng)非常豐富,非常適合于快速增殖,高密度細胞培養(yǎng)。IMDM培養(yǎng)基不僅可以培養(yǎng)有特殊營養(yǎng)要求的細胞,還可以作為一些特別的無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)液。IMDM培養(yǎng)基的使用方法:
1、準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
2、校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
3、過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用IMDM(含雙抗)紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
4、分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
5、滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*底滅菌的目的。