Gibco培養(yǎng)基是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)的高品質(zhì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它提供了細(xì)胞生長所需的多種營養(yǎng)物質(zhì),包括氨基酸、維生素、無機(jī)鹽、葡萄糖等。為了確保細(xì)胞培養(yǎng)的成功,正確配制和使用至關(guān)重要。 一、配制Gibco培養(yǎng)基
1、準(zhǔn)備工作:
確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境干凈整潔,避免微生物污染。
準(zhǔn)備好所需的所有試劑和器具。
2、計(jì)算所需量:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類型,計(jì)算所需培養(yǎng)基的體積和濃度。
3、稱量試劑:
在無菌操作臺(tái)上,按照計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱量各種試劑。
4、溶解與混合:
將稱量好的試劑依次加入預(yù)先加入一定量無菌水的容量瓶中,輕輕搖晃使其充分溶解。
5、定容與過濾:
加入無菌水至容量瓶刻度線,混勻后用濾膜過濾除菌。
6、儲(chǔ)存與使用:
將配制好的培養(yǎng)基分裝至無菌試管或培養(yǎng)瓶中,標(biāo)記好日期和成分,置于冰箱保存?zhèn)溆谩?/span>
二、使用Gibco培養(yǎng)基
1、細(xì)胞接種:
在無菌操作臺(tái)上,將細(xì)胞懸液接種至含有適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中。
2、培養(yǎng)條件:
根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整培養(yǎng)箱的溫度、濕度和氣體成分,確保細(xì)胞處于較佳生長環(huán)境。
3、換液與傳代:
定期更換新鮮培養(yǎng)基,去除代謝廢物;當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到一定程度時(shí),進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
4、觀察記錄:
密切觀察細(xì)胞生長狀況,記錄細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量及培養(yǎng)基顏色變化等信息。
三、注意事項(xiàng)
1、避免污染:
整個(gè)配制和使用過程中要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,防止微生物污染。
2、注意有效期:
使用前檢查培養(yǎng)基的有效期,過期培養(yǎng)基不宜使用。
3、兼容性測(cè)試:
對(duì)于特殊細(xì)胞系,建議先進(jìn)行培養(yǎng)基兼容性測(cè)試,以確保細(xì)胞能夠正常生長。